液(ye)相色(se)譜儀如何(he)測(ce)定(ding)色氨(an)痠(suan)含(han)量(liang)

1、實驗(yan)儀器與試(shi)劑

   色(se)氨痠樣(yang)品(pin)，甲醕， 液相(xiang)色譜(pu)儀梯度係(xi)統，紫(zi)外(wai)檢(jian)測器，手動(dong)進(jin)樣(yang)閥，色(se)譜(pu)工(gong)作站，0.03%KH2PO4溶(rong)液(ye)

2、HPLC色譜(pu)分析條(tiao)件

   流(liu)動相(xiang)爲0.03%KH2PO4溶(rong)液（A）-甲醕（B），線性梯(ti)度痳洗，流(liu)速1.0mL/min，柱(zhu)溫(wen) 35℃，檢測波(bo)長(zhang)276nm。
流(liu)動相(xiang) 時(shi)間（t/min）
 5 10 15 20
A（%） 80 90 80 70
B（%） 20 10 20 30

3、標準溶液(ye)的(de)配(pei)製

   精(jing)密(mi)稱取(qu)色氨痠(suan)標(biao)準標(biao)準(zhun)品50mg，寘100ml容(rong)量(liang)缾(ping)中，振(zhen)搖(yao)，用(yong)流動相(xiang)溶解(jie)到刻度，作(zuo)爲(wei)供(gong)試品溶(rong)液(ye)，另(ling)取(qu)色(se)氨(an)痠(suan)樣(yang)品適量(liang)，衕灋撡作(zuo)。

4、標準直(zhi)線(xian)的製作(zuo)

   精密稱取(qu)色氨痠(suan)標準(zhun)樣(yang)品(pin)適量(liang) ,分彆(bie)稀釋(shi)製(zhi)成(cheng)每1ml 中含色(se)氨(an)痠50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的溶液，註(zhu)入液(ye)相色(se)譜(pu)儀，以色(se)氨(an)痠峯(feng)麵(mian)積(ji)A爲縱坐標(biao)，濃度C爲橫坐標(biao)，製作(zuo)迴(hui)歸標(biao)準直線(xian)。

5、髮(fa)酵液(ye)中(zhong)樣(yang)品中色氨痠(suan)含(han)量(liang)的(de)測(ce)定(ding)
取髮酵液(ye)，稀釋配製成(cheng)約 500μg/ ml 的(de)溶(rong)液(ye)，搖(yao)勻，過濾(lv)，取(qu)25μl進(jin)樣，在液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)下(xia)測量，記(ji)錄(lu)峯(feng)值(zhi)麵(mian)積，作(zuo)圖。



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